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乳酸菌在水产生态养殖上的应用

随着水产养殖业集约化发展速度加快,疾病问题和环境污染问题成为阻碍行业发展的两大难题。2020年农业农村部通过广泛开展“五大行动”,大力推广生态健康养殖模式,其中对稳步推动水产养殖尾水治理,持续促进水产养殖用药减量,尤为重视。因此,寻找抗菌药物替代品,开发新的生态养殖模式,保护环境,势在必行!

乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。这类细菌在自然界分布极为广泛,具有丰富的物种多样性。在食品、饲料、化工、医药、养殖等多方面表现出良好的作用效果。

其中,乳酸菌产酸、产酶、产细菌素的特点,使其在水产健康养殖中显现出巨大的应用价值。


乳酸菌


乳酸片球菌


1、抑制病原菌繁殖

乳酸菌代谢产生大量的乳酸、乙酸,少量的甲酸、丙酸等其他酸性末端产物,这些酸性产物是其抗菌的重要力量。

在这些混合物组成的有机酸中,乳酸主要用来降低pH值以增强其它酸的活性;乙酸具有较强的抑菌活性和较宽的抑菌范围,可抑制真菌、细菌及其它一些有害微生物的生长和发育;丙酸对真菌有很强的抑菌作用。

乳酸除降低pH值外,还可穿透一些细菌细胞膜,抑制细胞膜对氨基酸的吸收和一些呼吸酶系的活性,从而达到抑制微生物生长和繁殖的目的。乳酸菌代谢同时会产生乳酸菌素,这一类具有生物活性的蛋白质、多肽或前体多肽,可以杀灭或抑制与之处于相同或相似生活环境的其他微生物,具有固定的抗菌谱,对病原菌和腐败菌具有很强的抑制能力,具有天然安全性。

Muioz-Atienza等以分离自水产动物的16株乳酸菌为研究对象,研究了其对常见鱼病病原菌的抑制作用,并进行了安全性初步评价。

结果表明,来源于大西洋生、大西洋鳍、欧洲鸟尾蛤、真蜻、欧洲狼鲈、虹鲜鱼的16株乳酸菌对格式乳球菌(JIP29-99)、无乳链球菌(CF01173)、嗜水气单胞菌( CECT5734)、海豚链球菌( LMG14521)、幔利斯顿氏菌( CECT4344、CECT7199) 5 种常见鱼病病原菌均有抑制作用,而这16株菌对嗜水气单胞菌和鲤利斯顿氏菌均表现出较强的抑制作用,抑制圈直径≥10 mm。因此乳酸菌是抗菌药物的重要替代品之一。


2、解除藻毒素和内毒素

养殖水体"水华"可产生大量藻毒素使水源污染,藻毒素可通过消化道途径进入动物体内,引起神经麻痹、肝损伤,严重者可发生中毒甚至死亡。

在藻毒素中以蓝藻毒素为多,主要包括肝毒素、神经毒素和内毒素。淡水水体中蓝藻毒素已成为全球性的环境问题。目前主要的去除藻毒素的方法有活性炭吸附、化学降解(如臭氧、高铁酸盐、硝酸镧、紫外线等处理)及微生物降解等方法。微生物降解法具有成本低,无二次污染的优势。

王松等研究乳酸菌对微囊藻毒素的清除效果,实验结果显示:3株实验乳酸菌均具有清除藻毒素的能力,当藻毒素初始浓度为150 μg/L时,24h后残留藻毒素浓度为85.5 μg/L,清除率可达43%。

内毒素是革兰氏阴性致病菌细胞壁外层的脂多糖和脂蛋白组成,会刺激免疫系统引起炎性反应等。研究发现口服活性及灭活的乳酸菌可以去除肠道中的内毒素,从而避免或减弱了内毒素的毒害作用,从而保护养殖动物的健康。

研究表明口服乳酸菌的活细胞及热灭活细胞均能去除标记的LPS。其中,热灭活细胞的去除能力更强(活细胞的去除率为54.4%,热灭活细胞的去除率为86.2%)。


3、提高免疫力

乳酸菌是良好的免疫激活剂和非特异性免疫调节因子,能有效地激活鱼体免疫系统,提高鱼类的免疫力。

乳酸菌通过发酵产生的有机酸、特殊酶系、细菌表面成分等物质具有一定生理功能,可刺激组织发育,对机体的营养状态、生理功能、细胞感染、药物效应、毒性反应、免疫反应、衰老过程和应激反应等产生作用。

乳酸菌能促进淋巴细胞(如T、B淋巴细胞)、胸腺和脾脏等免疫器官的发育,有效提高干扰素和巨噬细胞的活性,通过产生非特异性免疫调节因子等激发机体免疫功能,增强机体免疫力和抗病力。

Huang 等研究了戊糖片球菌菌株LAB4012对青石斑鱼先天免疫、生理健康以及鲤弧菌引起弧菌病的影响。

结果表明,与对照组相比,相同接种量试验组的青石斑鱼死亡率显著降低(P<0.05);试验组增重的百分率显著提高(P< 0.05) ,头肾组织的抗炎因子 TGF-BI 极显著增加(P<0.01),脾中的促炎因子TNF-2显著降低(P<0.05)、IL-Iβ极显著降低(P<0.01);饲喂7d后接种致病菌前,实验组的红细胞数量与对照组相比极显著增加(P<0.01);接种后实验组的红细胞、白细胞数量和头肾组织巨噬细胞吞噬活性与对照组相比极显著增加(P<0.01)。

以上试验结果表明,乳酸菌可以作为饲用益生菌添加到饲料中,在调节水产动物免疫和抵抗致病菌感染方面发挥益生作用。


4、改善水环境

乳酸菌属于异养型微生物,在厌氧或兼性厌氧条件下都能分解和利用多种有机碳、氮物质,是生物法处理污水的重要微生物,乳酸菌应用于水质净化的效果良好。

在成鱼养殖池中使用乳酸菌,实验池溶氧量比对照池提高11.2%,NH4+-N和 NO2--N 含量分別降低了 54%、55%,饵料系数降低8.2%,单位面积净产量提高 14.4%。

范毛毛等在草鱼饲料中添加 0.2%~0.4%的高性能乳酸菌,每 10d 拌饵投喂 1次,使用3个月后,水体中的NH4+- N、NO2--N、HS等有物质含量下降,溶氧量和水体透明度显著增加,草鱼的产量有所提高。宋蓉研究了7株 乳酸菌对水质改良效果。他的研究发现,在合适的碳源浓度下,2d后乳酸菌能够去除 23%的亚销酸盐。

乳酸菌在生长代谢过程中分泌一种糖类化合物胞外多糖,它包括美膜多糖和粘质多糖这些分泌到细胞外的代谢产物具有絮凝活性,形成微生物絮凝剂,它们通过对水体中不易降解的固体悬浮颗粒、有机碎屑等凝聚、沉淀来达到净化水质作用。

乳酸菌代谢产生的乳酸能降低及稳定水体酸碱度、维持水体的酸碱平衡。当藻类快速生长时,乳酸菌能激发食藻生物的繁殖,达到分解老化藻类和抑制藻类生长的效果,维持菌相和藻相平衡,达到净化水质的目的,从而形成有利于有益菌繁殖生长的适宜环境,改善生物体内的微生物种群。


综上所述,乳酸菌在水产健康养殖中作用前景广阔。同时,相较其他益生菌来讲,有很多优势,例如:兼性厌氧、解毒培藻、肠道定殖等,相信随着研究的进一步深入,定向筛选的功能性的乳酸菌将在水产养殖中大放异彩。

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